高效液相色譜儀由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。
對(duì)樣品的要求:
1、要求樣品能溶于水、乙腈、甲醇、乙醇,能夠在C18反相柱上保留,如使用其他色譜柱需自備;
2、需要提供測(cè)試組分的紫外吸收波長(zhǎng);
3、溶液樣品至少0.5ml,溶液須過(guò)濾膜,無(wú)不溶性顆粒;
4、定量需要提供標(biāo)準(zhǔn)品。
高效液相色譜儀的使用方法:
1、開(kāi)機(jī)設(shè)定參數(shù)(檢測(cè)波長(zhǎng)、流速),更換所需流動(dòng)相,檢查色譜柱是否正確。
2、排液置換管路中流動(dòng)相,沖洗進(jìn)樣閥,洗好進(jìn)樣針。
3、沖洗色譜柱進(jìn)行平衡,其間可提前進(jìn)行樣品的處理,樣品信息的注冊(cè)。
4、平衡好以后進(jìn)空白試驗(yàn),排除系統(tǒng)污染。
5、柱子穩(wěn)定好以后進(jìn)樣,等待運(yùn)行結(jié)束(其間清洗進(jìn)樣針),積分計(jì)算,出具報(bào)告。
注意事項(xiàng):
1、流動(dòng)相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。
2、柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過(guò)柱子。
3、所有過(guò)柱子的液體均需嚴(yán)格的過(guò)濾。
4、壓力不能太大,盡量不要超過(guò)2000 psi。